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酶聯免疫ELISA實驗標準品稀釋操作流程
ELISA標準品稀釋操作流程 天津本生試劑盒
一、標準品溶解
離心處理?:將凍干標準品短暫離心(6000-10000rpm,30秒),使管壁殘留粉末沉至管底?
溶解操作?:按說明書加入指定體積的蒸餾水或樣本稀釋液,室溫靜置10-30分鐘溶解,避免立即吹打
混勻要求?:溶解后渦旋振蕩或輕柔吹打混勻,形成原液(如S7濃度2000 pg/mL)?
二、梯度稀釋方法
準備離心管?:標記8個1.5mL離心管(S0-S7),S0管加入250μL樣本稀釋液作為空白對照?
倍比稀釋步驟?:
取250μL原液加入S6管,吹打混勻10次
從S6管轉移250μL至S5管,同法操作至S1管
最終濃度梯度:2000→1000→500→...→31.25 pg/mL?
三、關鍵注意事項
稀釋液選擇?:血清/血漿樣本需使用試劑盒配套稀釋液,避免基質干擾
操作規范?:大比例稀釋(如200倍)建議分步進行(先10倍再20倍)?
現配現用?:生物素標記抗體等試劑需在臨用10分鐘內配制?
四、常見問題處理
標準曲線異常?:檢查稀釋過程是否混勻充分,避免氣泡殘留
OD值超范圍?:確認標準品溶解,避免未溶解蛋白被槍頭帶走
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
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