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大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒實驗使用說明書主要包括試劑準備、樣本收集與處理、實驗操作及結(jié)果計算等部分?。以下是詳細說明：
?一、試劑準備?
試劑盒組件：通常包括酶標包被板、標準品、標準品稀釋液、酶標試劑、樣品稀釋液、顯色劑A液和B液、終止液、封板膜、洗滌液等?。
試劑保存與平衡：試劑盒應(yīng)保存在2-8℃或-20℃(長期不用時)。使用前，將試劑盒從冰箱中取出，在室溫下放置20-30分鐘，使試劑盒與室溫平衡?。
?二、樣本收集與處理?
樣本類型：包括血清、血漿、尿液、腦脊液、細胞固體組織等?2。
血清與血漿處理：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液，離心分離血清和紅細胞。血漿可使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心去除顆粒?。
樣本保存：若樣本不立即使用，應(yīng)分成小部分在-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。避免使用溶血或高血脂血樣本?。
?三、實驗操作?
加樣：在待測樣品孔中加入待測樣品，每種樣品設(shè)3個平行孔。同時設(shè)立陰性對照孔和空白對照孔?。
酶標板包被：將酶標板置于4℃，包被過夜?。
洗板：使用洗滌液洗滌板孔，重復(fù)洗滌3-4次?。
加酶標試劑與顯色：加入酶標試劑，然后加入顯色劑A液和B液，進行顯色反應(yīng)?。
終止與測定：加入終止液終止反應(yīng)，使用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)?。
?四、結(jié)果計算?
繪制標準曲線：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪制標準曲線?。
樣品濃度計算：根據(jù)樣品的OD值，由標準曲線查出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。或者使用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式計算樣品濃度?1。
請注意，實驗操作時應(yīng)嚴格按照說明書進行，避免污染和誤差。不同品牌和批次的試劑盒可能略有差異，請仔細閱讀具體試劑盒的說明書。
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