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大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書
BS-3658 天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒
大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書主要包括以下內(nèi)容：
1. ?實(shí)驗(yàn)原理?
該試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通過(guò)純化的大鼠Klotho蛋白抗體包被微孔板，形成固相抗體，依次加入Klotho蛋白和HRP標(biāo)記的Klotho蛋白抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后，加入底物TMB顯色，顏色深淺與樣品中Klotho蛋白含量呈正相關(guān)。最后用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?。
2. ?試劑盒組成?
30倍濃縮洗滌液：20ml×1瓶
酶標(biāo)試劑：6ml×1瓶
標(biāo)準(zhǔn)品：2瓶
稀釋液：1×45mL
檢測(cè)溶液A：1×120μL
檢測(cè)溶液B：1×120μL
TMB底物：1×9mL
終止液：1×6mL
96孔板(預(yù)包被)：1塊
96孔板覆膜：2張
使用說(shuō)明書：1份?。
3. ?樣本處理及要求?
血清?：全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，1000×g離心20分鐘，取上清，避免反復(fù)凍融?。
血漿?：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃離心，取上清?。
細(xì)胞上清液?：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒?。
組織勻漿?：將組織加入適量生理鹽水搗碎，離心后取上清?。
4. ?實(shí)驗(yàn)步驟?
加樣：標(biāo)準(zhǔn)品及樣本各50μL，37℃孵育30分鐘?。
洗滌：洗板5次，加入酶標(biāo)試劑50μL，37℃孵育30分鐘?。
顯色：加入顯色液A、B各50μL，37℃孵育15分鐘?。
終止：加入終止液50μL，立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度?。
5. ?注意事項(xiàng)?
試劑盒需在2-8℃保存，開封后酶標(biāo)板需密封保存于-20℃?。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需避免樣本反復(fù)凍融，確保操作環(huán)境溫度、濕度一致?。
試劑盒有效期一般為6個(gè)月至12個(gè)月，具體以標(biāo)簽為準(zhǔn)?。
6. ?適用范圍?
該試劑盒適用于體外定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中Klotho蛋白的含量?。
以上內(nèi)容綜合了多個(gè)來(lái)源的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書，確保實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和可靠性?。
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