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兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-4223 兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒
以下是天津本生?兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒?的標準化實驗操作說明：
一、檢測原理?
采用?雙抗體夾心法?：
包被抗兔CRP抗體捕獲樣本中的CRP;
加入生物素化抗體形成復合物，再結合HRP標記鏈霉親和素;
TMB顯色，OD450nm吸光度值與CRP濃度正相關。
二、試劑盒組成?
組分 保存條件 規格與備注
預包被微孔板 4℃干燥 96孔(可拆卸)
CRP標準品 -20℃(凍干粉) 濃度梯度：39-5000 ng/mL
HRP標記檢測抗體 4℃避光 含辣根過氧化物酶
TMB顯色液A/B 4℃避光 現配現用
終止液 室溫 顯色終止
20×濃縮洗滌液 室溫 使用前稀釋
三、樣本處理?
血清/血漿?：
全血室溫靜置2小時或4℃過夜，離心(1000×g，20分鐘)取上清;
避免溶血或反復凍融。
組織勻漿?：
按重量比加入PBS勻漿，離心(3000 rpm，10分鐘)取上清。
細胞培養上清?：直接離心去除沉淀。
四、實驗步驟?
標準品稀釋?：
凍干標準品用稀釋液復溶，梯度稀釋為2500 ng/mL至39 ng/mL。
加樣與孵育?：
每孔加入50μL樣本或標準品，37℃孵育30分鐘;
洗滌5次(手動或自動洗板機)。
顯色與檢測?：
加入TMB顯色液(A/B各50μL)，避光反應15分鐘;
加終止液50μL，立即450nm測OD值。
五、數據分析?
以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制曲線;
樣本濃度=曲線對應值×稀釋倍數。
六、注意事項?
質量控制?：
空白孔OD值應<0.1，板內變異系數<10%;
避免NaN3污染(抑制HRP活性)。
保存條件?：
未開封試劑盒2-8℃保存6個月，開封后盡快使用。
七、常見問題?
邊緣效應?：溫育時使用水浴或預熱板/試劑至37℃以消除;
無信號?：檢查酶標抗體活性及洗滌是否。
BS-4223兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒 天津本生
注：以上資料僅供參考，不作為實際應用。如需具體品牌試劑盒的差異操作(如本生、天正信達等)，建議參考對應說明書。
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