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以下是兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒的實驗室使用說明綜合指南：
BS-4200 兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 天津本生
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法ELISA技術，通過包被抗兔EGF抗體捕獲樣本中的目標蛋白，依次加入HRP標記檢測抗體和TMB底物顯色，顏色深度與EGF濃度呈正相關。
二、試劑盒組成
組分 96孔配置 48孔配置
預包被微孔板 1×96 1×48
標準品(凍干粉) 0.5ml×1 0.5ml×1
HRP標記抗體 6ml 3ml
TMB顯色液 A/B液各6ml A/B液各3ml
20×洗滌緩沖液 25ml 15ml
終止液 6ml 3ml
三、樣本處理要求
血清/血漿?：采集后30分鐘內2-8℃離心(1000×g,20分鐘)，-20℃保存避免反復凍融
組織勻漿?：按1:9比例加入PBS勻漿，5000×g離心5-10分鐘取上清
細胞上清?：1000×g離心20分鐘去除沉淀
四、標準品配制
加入1ml蒸餾水復溶凍干標準品，配成480pg/ml母液
倍比稀釋建立標準曲線(建議濃度梯度：480/240/120/60/30/0 pg/ml)
五、檢測步驟
加樣?：標準品/樣本各加100μl，37℃孵育120分鐘
洗滌?：1×洗滌液洗板4-6次，每次浸泡1-2分鐘
加酶標抗體?：100μl/孔，37℃孵育60分鐘
顯色?：加TMB避光反應10-20分鐘
終止?：加終止液后30分鐘內450nm測OD值
六、注意事項
所有試劑使用前需平衡至室溫
避免溶血/脂血樣本影響結果
顯色液變藍即失效，不可使用
不同批次試劑不可混用
七、技術參數
檢測范圍：15-480 pg/mL
靈敏度：<15 pg/mL
板內/板間變異系數：<10%
注：以上資料僅供參考，建議實驗時設置復孔并同步制作標準曲線。具體操作細節可能因品牌差異需參考對應說明書。
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