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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理
BS-3017 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒
基于?雙抗體夾心法?，其核心流程與VEGF家族其他成員(如VEGF-A)的檢測方法類似，具體步驟如下：
實(shí)驗(yàn)原理詳解
抗體包被?
微孔板預(yù)先包被抗VEGF-B的特異性捕獲抗體，形成固相抗體層，用于結(jié)合樣本中的目標(biāo)抗原?。
抗原-抗體結(jié)合?
樣本(如血清、組織勻漿)與標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中，VEGF-B與捕獲抗體結(jié)合，形成“固相抗體-抗原"復(fù)合物?。
酶標(biāo)抗體反應(yīng)?
加入生物素標(biāo)記的檢測抗體(或HRP標(biāo)記的二抗)，與抗原的另一表位結(jié)合，形成“捕獲抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"夾心結(jié)構(gòu)?。
顯色與定量?
加入TMB底物后，酶催化反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，終止后變?yōu)辄S色。通過酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，其強(qiáng)度與VEGF-B濃度呈正相關(guān)?。
關(guān)鍵特點(diǎn)
特異性?：雙抗體設(shè)計(jì)確保對VEGF-B的高特異性，避免與其他VEGF家族成員交叉反應(yīng)?。
靈敏度?：檢測范圍通常為31.2–2000pg/mL，適用于低濃度樣本分析?。
樣本兼容性?：支持血清、血漿等樣本類型，需注意抗凝劑選擇(如EDTA)以避免干擾?。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格控制孵育時(shí)間(通常37℃ 60分鐘)和洗滌次數(shù)，以減少背景信號(hào)?。
顯色反應(yīng)需避光操作，終止后30分鐘內(nèi)完成檢測以保證數(shù)據(jù)穩(wěn)定性?。
如需進(jìn)一步了解VEGF-B的生物學(xué)功能或?qū)嶒?yàn)優(yōu)化細(xì)節(jié)，可參考相關(guān)文獻(xiàn)或試劑盒說明書?。
注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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